Sodium sitrat buffer digunakan untuk isolasi RNA karena meminimalkan hidrolisis dasar untaian RNA. Ini menjadikannya langkah penting dalam pemurnian mRNA selama penelitian genomik atau untuk mempelajari transkripsi.
Buffer berbasis sitrat juga dapat membantu mendeteksi antigen dalam preparasi jaringan tetap karena mereka memutus tautan silang yang terbentuk antara antigen dan media fiksasi.
Dengan panduan di bawah ini, buat buffer natrium sitrat pH 6. Petunjuknya tidak hanya mudah tetapi juga cepat untuk dijalankan. Hanya perlu sekitar 10 menit untuk menyelesaikan langkah-langkah ini.
Dua Pilihan untuk Membuat Buffer
Ada dua cara untuk membuat buffer natrium sitrat. Pertama, tentukan apakah Anda memiliki asam sitrat dan basa konjugat, natrium sitrat, untuk digunakan. Jika Anda hanya memiliki asam sitrat, itu bukan masalah. Anda masih bisa membuat buffer.
Di sisi lain, jika Anda memiliki asam dan basa, buat larutan stok masing-masing. Campurkan 21 gram asam sitrat dalam 1 liter air suling, dan 29,4 gram natrium sitrat dalam 1 liter air suling.
Jika Anda hanya memiliki asam sitrat, campurkan 2,1 gram hanya di bawah 1 liter air suling dan lanjutkan ke langkah berikutnya.
Campuran Citric Acid dan Sodium Citrate Solutions
Sekarang setelah Anda membuat larutan stok (jika Anda memiliki asam dan basa) atau mencampur asam Anda dalam air suling (jika tidak), Anda bisa fokus pada solusi Anda.
Campurkan 82 mililiter larutan asam sitrat dengan 18 mililiter larutan natrium sitrat.
Kemudian, buat total volume campuran hingga di bawah 1 liter dengan air suling. Biarkan volume yang cukup untuk memungkinkan penambahan natrium hidroksida (NaOH) pada langkah berikutnya.
Menyesuaikan pH
Sambil mengaduk perlahan solusi menggunakan pengaduk magnet, gunakan natrium hidroksida 1M untuk menyesuaikan pH campuran hingga 6.0. Setelah itu, buat volume akhir larutan hingga 1 liter dengan air suling dengan menggunakan labu volumetrik.
Apa yang Anda Butuhkan untuk Membuat Buffer
Tidak hanya tidak memakan waktu lama untuk membuat buffer natrium sitrat, Anda juga tidak akan membutuhkan banyak bahan untuk itu. Dengan asam sitrat, 1M natrium hidroksida, air suling, dan probe pH yang dikalibrasi, Anda akan setengah jalan di sana. Menggunakan natrium sitrat adalah opsional.
Pembuatan buffer juga akan membutuhkan 1 liter gelas yang diluluskan, 1 liter volumetrik labu, dan tiga botol media 1 liter. Terakhir, Anda akan membutuhkan batang pengaduk magnet dan pengaduk magnet.
Jika Anda tidak memiliki semua materi ini, pertimbangkan untuk menggunakan lab di sekolah atau tempat kerja Anda, jadi Anda tidak perlu membelinya sendiri. Anda juga dapat dengan mudah membeli bahan-bahan ini secara online atau mengunjungi toko barang khusus di daerah Anda.