Dasar-dasar kultur pengeringan beku (lyophilization)
Lyophilization, juga dikenal sebagai freeze-drying, adalah proses yang digunakan untuk melestarikan bahan biologis dengan mengeluarkan air dari sampel, yang melibatkan pembekuan pertama sampel dan kemudian mengeringkannya, di bawah vakum, pada suhu yang sangat rendah. Sampel lyophilized dapat disimpan lebih lama daripada sampel yang tidak diobati.
Mengapa Lyophilization Digunakan
Lyophilization, atau pembekuan beku kultur bakteri , menstabilkan kultur untuk penyimpanan jangka panjang sambil meminimalkan kerusakan yang mungkin disebabkan oleh pengeringan sampel secara ketat.
Banyak mikroorganisme bertahan hidup dengan baik ketika lyophilized dan dapat dengan mudah direhidrasi dan tumbuh di media kultur, setelah periode waktu yang lama dalam penyimpanan.
Lyophilization juga digunakan dalam industri bioteknologi dan biomedis untuk melestarikan vaksin, sampel darah, protein yang dimurnikan , dan bahan biologis lainnya.
Prosedur laboratorium singkat ini dapat digunakan dengan pengering beku yang tersedia secara komersial untuk melestarikan koleksi budaya Anda.
Proses Lyophilization
Proses lyophilization sebenarnya merupakan aplikasi dari fenomena fisik yang disebut sublimasi: transisi zat dari padat ke keadaan gas, tanpa terlebih dahulu melewati fase cair. Selama lyophilization, air dalam sampel beku dihapus sebagai uap air, tanpa terlebih dahulu mencairkan sampel.
Kesalahan Umum
Salah satu kesalahan paling umum ketika berbicara tentang liofilisasi adalah tidak mengetahui titik leleh sampel Anda, yang membuatnya sulit untuk memilih lyophilizer yang benar.
Sampel Anda mungkin mencair selama proses tersebut. Kesalahan umum lainnya adalah berpikir lebih dingin lebih baik ketika pengeringan beku pada pengering beku jenis rak. Selama pengeringan primer, Anda harus mengatur suhu rak hingga tepat di bawah suhu eutektik sampel. Harus ada cukup panas untuk mendorong molekul sampel bergerak - tetapi mencegah meleleh.
Kesalahan ketiga adalah menggunakan peralatan yang salah untuk sampel Anda. Karena freeze dryers digunakan dalam pengaturan grup, Anda harus mengetahui hal berikut sebelum membeli satu:
- Berapa banyak kelembapan akan diliofilisasi
- Apa contohnya (dan suhu eutektik)
- Cara menggunakan pengering beku dengan benar
Jika unit tidak digunakan dengan benar, itu bisa merusak semua sampel. Yang membawa kita ke kesalahan umum lainnya: Tidak mempertahankan pompa vakum. Pompa harus bekerja dengan sangat baik agar lyophilization bisa berfungsi. Menjalankan pompa dengan ballast gas terbuka 30 menit sebelum dan setelah proses pengeringan beku akan meningkatkan masa pakai pompa. Membuka pemberat gas membersihkan kontaminan keluar dari pompa untuk mencegah kerusakan pada komponen internal. Anda harus sering memeriksa oli pompa untuk perubahan warna dan partikel, dan mengganti oli sesuai kebutuhan. Perubahan oli teratur membuat pompa menarik pada vakum optimal selama proses pengeringan beku.
Terakhir, memiliki aksesoris pengeringan beku yang salah untuk proses lyophilization Anda juga bisa menjadi kesalahan besar. Apakah Anda memerlukan sampel stopper di bawah vakum Anda? Maka diperlukan ruang pemberhentian. Apakah Anda beku-pengeringan dalam botol? Kemudian pastikan untuk memiliki ruang pengering dengan port.
Dengan menghindari kesalahan di atas, Anda dapat memberikan perawatan yang lebih baik untuk pengering dan pompa freeze Anda, dan memiliki sampel yang lebih baik ketika pengeringan beku Anda selesai.
Referensi
Berita Labconco. "5 kesalahan teratas yang dibuat dalam proses liofilisasi." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes